Skip to content

Skierowanie na fibroblasty związane z nowotworem poprawia chemioterapię raka poprzez zwiększenie wewnątrznormalnego poboru leku ad 6

4 tygodnie ago

734 words

Dodatkowo, wcześniej wykazaliśmy, że podawanie szczepionki DNA, przy użyciu atenuowanego S. typhimurium jako nośnika szczepionki, może przedłużyć działanie przeciwnowotworowe do 10 miesięcy, a także uzyskać znaczną regulację w górę markerów komórek T, komórek NK i dendrytycznych aktywatorów komórkowych (26). 29). Ponadto, zubażanie in vivo komórek T i NK w naszych obecnych doświadczeniach wskazuje na zaangażowanie CD8 +, ale nie komórek T CD4 + lub NK. Jak pokazano, działanie cytotoksyczne, w którym pośredniczą komórki T CD8 + in vitro, było swoiście skierowane przeciwko komórkom docelowym z nadekspresją antygenu FAP. Możemy również wykluczyć niespecyficzne odpowiedzi immunologiczne, ponieważ tylko komórki T CD8 + od myszy zaszczepionych pFap indukowały lizę cytotoksyczną in vitro komórek nowotworowych i fibroblastów z nadekspresją FAP. Ponadto, guzy myszy szczepionych pFap wykazywały bardziej wyraźną infiltrację komórkami T CD8 + niż guzy myszy zaszczepionych kontrolą z pustym wektorem. Chociaż FAP można również przejściowo nadeksprymować podczas gojenia się ran, szczepienie przeciw FAP nie zaburzyło gojenia się rany, ani nie spowodowało żadnych dostrzegalnych reakcji autoimmunologicznych w 26 tkankach i narządach zbadanych histologicznie. Funkcjonalna redundancja białek z funkcją nakładania się może wyjaśnić tę obserwację (30). Przetestowaliśmy także 3 różne cząsteczki efektorowe jako adiuwanty w nadziei na poprawę skuteczności naszej szczepionki: IL-2, induktor proliferacji komórek T (31); CCL21, chemokina, która chemoatruje dojrzałe komórki dendrytyczne (32) i naiwne komórki T (33); i CD40LT, znany induktor dojrzewania komórek dendrytycznych (34) (dane nie przedstawione). Jednoczesne podawanie wszystkich 3 z tych cząsteczek efektorowych nie poprawiło skuteczności szczepionki. Wskazuje to, że odpowiedź CTL indukowana przeciwko fibroblastom nowotworowo-zrębowym jest wystarczająca do zahamowania wzrostu różnych guzów, ale nie wystarcza do odrzucenia ich jako pojedynczego podmiotu. Może to wynikać z faktu, że komórki nowotworowe i makrofagi związane z guzem mogą wywoływać nadmiarowość przez syntezę różnych białek promujących nowotwór, takich jak VEGF (35, 36), TGF-pi (37, 38) i IL-4. 10 (38, 39), stężenia w surowicy, których nie byliśmy w stanie obniżyć za pomocą naszej szczepionki (dane nie przedstawione). Uzasadnienie łączenia szczepionek na raka z chemioterapią zostało obszernie udokumentowane i przeanalizowane w innym miejscu (40). Oprócz potencjału immunostymulującego różnych chemioterapeutyków, takich jak doksorubicyna, paklitaksel i cyklofosfamid, które nie powodują supresji szpiku kostnego przy podawaniu w małych dawkach, połączenie naszej szczepionki FAP z takimi lekami oferuje dodatkową korzyść, w szczególności obniżenie ekspresja kolagenu typu I, a co za tym idzie, zwiększenie wewnątrzmacicznego wychwytu różnych środków chemioterapeutycznych. Wykazaliśmy to za pomocą 3 strukturalnie niezwiązanych cząsteczek: niskocząsteczkowego barwnika fluoresceiny (376 Da), wysokomolekularnej mieszanki błękitnej albuminy Evansa (68 500 Da) i środka chemioterapeutycznego 5-fluorouracylu (130 Da). Wydaje się, że zmiany, które zachodzą u zwierząt szczepionych pFap, ułatwiają zarówno procesy odpowiedzialne za transport wewnątrz guza, tj. Dyfuzję małych cząsteczek, jak i konwekcję w przypadku większych cząsteczek (41. 44). Odkrycia te potwierdzają nowe uzasadnienie poprawy chemioterapii poprzez połączenie jej z immunoterapią. Rzeczywiście, wykazaliśmy, że połączenie szczepionki DNA kodującej FAP z doksorubicyną może wywołać całkowite odrzucenie ortotopowo wyhodowanych guzów sutka u 50% myszy, jak również ponad 3-krotne wydłużenie życia myszy z eksperymentalnie wywołanymi przerzutami raka sutka , wynik, który nie został osiągnięty, gdy którykolwiek z tych zabiegów był stosowany sam. Ponadto, wykazaliśmy, że ilość doksorubicyny w tkance guza myszy szczepionych pFap jest znacząco zwiększona w porównaniu z ilością myszy kontrolnych zaszczepionych pustym wektorem. Podsumowując, nasze odkrycia pokazują, po raz pierwszy, zgodnie z naszą wiedzą, skuteczność doustnej szczepionki DNA w wywoływaniu odpowiedzi immunologicznej mediowanej przez limfocyty T CD8 + przeciwko antygenowi FAP z podścieliska nowotworowego. Co ważniejsze, nasza szczepionka na bazie DNA przeciwko FAP, w połączeniu z doksorubicyną, była w stanie zahamować wzrost guza i doprowadzić do całkowitego odrzucenia guza u 50% myszy. Ponadto zaobserwowaliśmy ponad 3-krotnie wydłużoną długość życia w modelu doświadczalnym przerzutów raka sutka, co było przynajmniej częściowo spowodowane zwiększonym wychwytem leku w miejscu guza. Oczekuje się, że to i inne badania, które obejmują kombinacje immuno- i chemioterapii, mogą wkrótce doprowadzić do nowych podejść w praktyce klinicznej i poprawy obecnie dostępnych metod leczenia raka. Metody Zwierzęta, szczepy bakterii i linie komórkowe
[podobne: lowisko zgoda, błonnik witalny gdzie kupić, herbata czarna właściwości ]
[podobne: łowisko mąkolno, łowisko u bogdana, łowisko u roberta ]