Skip to content

IFN- chroni krótkoterminowe linie komórek raka jajnika przed lizy CTL poprzez mechanizm zależny od CD94 / NKG2A czesc 4

1 miesiąc ago

62 words

K562 nie został zabity przez KV109 z wyłączeniem niespecyficznej aktywności NK-CTL. Następnie użyliśmy klonu komórek T o wysokim powinowactwie swoistego dla epitopu związanego z EBLA4 ograniczonego przez HLA-A114 (IVT) jako komórek efektorowych przeciwko peptydowo traktowanemu HLA-A11p-dodatnim OVAC 16. To ujawniło, że liza specyficzna dla peptydu była również zahamowana. przez IFN-. leczenie tego OVAC (p <0,01, rysunek 1b). Przeciwnie, IFN-y nie wpływało na rozpoznawanie linii LCL transfekowanej peptydem HLA-A11 (C1R / A11). leczenie (Figura 1c). Ochronę OVAC za pośrednictwem IFN -. Obserwowano przy wszystkich badanych stężeniach peptydów (P <0,01, Figura 1d). Konieczne było dziesięciokrotnie wyższe stężenie peptydu, aby osiągnąć podobny poziom lizy IFN - a, poddanego OVAC 16, w porównaniu z nieleczonym OVAC 16. Ponadto, maksymalna liza potraktowanego IFN - a OVAC 16 wynosiła w przybliżeniu 50%. poziom obserwowany w przypadku komórek nietraktowanych. IFN - a traktowany OVAC 16 był również chroniony przed lizą przez autologiczne TAL (P <0,01, Figura 1e). Jednak te TAL wykazały aktywność aktywatora limfokin (LAK), określoną przez lizę K562. Hodowle TAL składały się głównie z limfocytów T (średnia, 87%), ale zmienny procent komórek NK był zwykle obecny w tych hodowlach. W celu oceny, czy OVAC generalnie zyskały odporność na lizę CTL po IFN-y leczenia, założyliśmy kilka OVAC HLA-A2 +. IFN-. traktowanie wszystkich dziewięciu testowanych linii komórkowych skutkowało silną ochroną przed lizą przez panel różnych CTL ograniczonych HLA-A2 (Tabela 1). Przeciwnie, linie komórek czerniaka traktowane IFN-y (DFW i CKMel-1) i linia raka sutka (MDA 231) były zabijane na poziomie podobnym lub wyższym niż guzy nieleczone. Ponadto, długotrwała, rozmnażana in vitro linia komórkowa raka jajnika Caov-4 była zabijana wydajniej po IFN-y. leczenie. Podsumowując, wyniki te wykazały, że wszystkie OVAC traktowane IFN - a były chronione przed CTL, w przeciwieństwie do długookresowych ustalonych linii komórkowych o różnym pochodzeniu nowotworowym. Wyniki te nie wynikały z obniżonej żywotności lub funkcji CTL nałożonych przez nowotwory, ponieważ komórki T, które były hodowane wspólnie z traktowanymi IFN - a, niedopasowanymi HLA - OVAC pozostały w pełni zdolne do zabicia linii komórkowej trzeciej strony (dane nie przedstawione). . Ponadto, nie było dowodów na ogólną oporność na apoptozę lub śmierć komórek w OVAC traktowanych IFN-y, ponieważ komórki te były bardziej wrażliwe na zabijanie za pośrednictwem Fas, indukowane przez anty-Fas Ab, w porównaniu z nieleczonymi OVAC (dane nie pokazane). ). Rysunek 1FN-. chroni krótkoterminowe raki jajnika przed lizą CTL. Wpływ IFN-y o rozpoznawaniu CTL OVAC oceniano w 4-godzinnych testach uwalniania 51Cr. (a) K562 i nietraktowany lub traktowany IFN - a OVAC 16 (HLA-A11 +) zastosowano jako cel dla swoistego dla HLA-A11a klonu CD8 + CTL KV109. (b) OVAC 16 nie był traktowany lub traktowany IFN-y. a następnie pulsuje lub nie pulsuje ograniczonym przez HLA-Allp, epitopem pochodzącym z EBNA4 w stężeniu ug / ml i stosuje się go jako cel dla specyficznego wobec IVT klonu komórek T CD8 + BK289. (c) C1R / A11 nie było traktowane lub traktowane IFN-y; a następnie pulsuje lub nie pulsuje peptydem IVT (1 .g / ml) i stosuje się go jako cel dla BK289. (d) Nieleczona lub traktowana IFN-a OVAC 16 została wstępnie pobudzona peptydem IVT w stężeniach w zakresie od 10. 12 do 10. 6 g / ml i zastosowana jako cel dla BK289 przy stosunku efektora do celu wynoszącym 3: . Rozpoznanie nie pulsujących celów było poniżej 7%. Przedstawiono wyniki jednego z co najmniej trzech eksperymentów. (e) K562 i nietraktowany lub traktowany IFN - a OVAC 16 był stosowany jako cel dla autologicznych TAL. Tabela 1IFN-. chroni szeroki panel OVAC przed lizą przez kilka ograniczonych HLA-A2. efektorów IFN-y leczenie skutkuje zwiększoną ekspresją całkowitej HLA klasy I, HLA-A2 i HLA-A11. IFN-. wiadomo, że reguluje ekspresję kilku składników maszyny do obróbki i prezentacji antygenu, co prowadzi do zwiększonej stabilności i ekspresji HLA klasy I na powierzchni komórki. Chociaż zaobserwowaliśmy paradoksalną ochronę przed lizą za pośrednictwem CTL, gdy komórki nowotworowe traktowano IFN-y, nie znaleźliśmy dowodów na zmienione działanie regulacyjne przez IFN-y. w sprawie ekspresji cząsteczek HLA klasy I. Ekspresja powierzchni całkowitej HLA klasy I, HLA-A2 i HLA-A11 została znacząco zwiększona przez IFN-y. leczenie wszystkich OVAC w tym badaniu, czego przykładem jest OVAC 16 na Figurze 2. Figura 2Intensywna funkcja regulacyjna IFN-y w wyrażeniu HLA klasy I w OVAC. OVAC 16 nie był traktowany lub traktowany IFN-y. przez 48 godzin, a następnie wybarwione pod kątem ekspresji całkowitej HLA klasy I, HLA-A2 i HLA-A11. Pokazano zabarwienia nietraktowanych komórek (linia przerywana) i komórki traktowane IFN-a (linia przerywana) [przypisy: prohormony skutki uboczne, lowisko zgoda, herbata czarna właściwości ] [hasła pokrewne: łowisko u roberta, u bogdana, lowisko zgoda ]