Skip to content

Zmniejszenie dystrofii mięśniowej u myszy poprzez nadekspresję SERCA w mięśniach szkieletowych ad 6

1 miesiąc ago

18 words

Oryginalne powiększenie, × 200. (B) Ocena ilościowa centralnego zarodkowania miofiberu w 2 grupach pobranych od 4 analizowanych myszy. * P <0,05 versus GFP. Dyskusja Utrata stabilności sarcolemicznej związanej z mutacjami w genach składających się na komponenty DGC lub wpływających na nie została uznana za kluczową zniewagę prowadzącą do opracowania MD (22, 28, 29). Rozregulowany i zwiększony napływ Ca2 + przez niestabilny sarkolem został zaproponowany do bezpośredniego zaprogramowania zwyrodnienia miofibru i wywołania choroby (3, 21). Na przykład podwyższony cytozolowy Ca2 + może zwiększać zależną od Ca2 + aktywność proteazy (kalpaina) i mitochondrialnego Ca2 + przeciążać indukowaną komórką a także zwiększać reaktywne formy tlenu i azotu, pośrednicząc w śmierci móżdżka (3, 7, 11, 21, 30). Na poparcie tej hipotezy, pewna liczba grup donosi o nienormalnie wysokich poziomach wewnątrzkomórkowego Ca2 + w dystroficznych miotubach i dorosłych miowłókienkach izolowanych z dystroficznych komórek mięśniowych (4. 6). Jednak inne grupy nie obserwowały podwyższonego wolnego cytozolowego Ca2 + w podobnych preparatach mięśniowych (8, 9). Dla porównania badania poświęcone kardiomiopatii u zwierząt z niedoborem sarkoglikanu są również zgodne z hipotezą Ca2 + o chorobie, ponieważ werapamil inhibitora Ca2 + typu L zmniejszał niektóre aspekty choroby serca w tym modelu myszy, podobnie jak terapia genowa z dominującym negatywnym fosfolambanem. białko (poprawia funkcję SERCA2a i klirens Ca2 +) w modelu chomika (31, 32). Nowsze dowody w genetycznie modyfikowanych modelach myszy dodatkowo wzmocniły hipotezę Ca2 + o chorobie w MD. Na przykład, nadekspresja przepuszczalnego dla Ca2 + / Na + kanału TRPC3 w mięśniu szkieletowym myszy Tg wytworzyła wszystkie histologiczne i biochemiczne cechy MD bez niestabilności błony (10). Myszy te wykazywały zwiększone wejście wapniowe wspomagane przechowywaniem (SOCE), które jest również obserwowane w innych modelach MD z powodu mutacji w komponentach DGC (10). Co więcej, to samo badanie wykazało również, że hamowanie endogennych kanałów TRPC z dominującym negatywnym transgenem transgenowym TRPC6 może znacząco osłabiać dystroficzny fenotyp w 2 oddzielnych mysich modelach MD (10). Iwata i in. również donieśli, że hamowanie dopływu Ca2 + przez kanały TRPV może łagodzić fenotyp dystroficzny (33). Dane te potwierdzają hipotezę, że zwiększony napływ Ca2 + sam wystarcza do zaindukowania MD, albo przez zdarzenia zerwania błony, albo aktywowane kanały. To, że transgen SERCA1 dramatycznie osłabia dystroficzną chorobę mięśni u myszy TRPC3 Tg, nie tylko w zasadzie udowadnia, że efekt jest całkowicie zależny od Ca2 +, ale także silnie sugeruje, że zwiększone cyklowanie i wychwyt zwrotny SR Ca2 + może bezpośrednio przeciwdziałać efektowi przecieku membrany w promowaniu degeneracji miofiberu. Wcześniejsze prace wykonane w tym laboratorium wykazały, że zwiększone stężenie cytozolowego Ca2 + może sprzyjać przeciążeniu mitochondrialnego Ca2 + w macierzy i martwicy komórek poprzez zdarzenia otwarcia MPTP (14). Na przykład, hamowanie otwierania MPTP przez genetyczną delecję cyklofiliny D lub zastosowanie Debio-025 zapobiegało śmierci komórki i zmniejszało fenotyp choroby mięśniowej u myszy Sgcd A / P, Lama2a / p i mdx (14). Zgodnie z ścieżką kierowaną przez Ca2 + do otwarcia MPTP i śmierci komórkowej obserwowaliśmy, że mitochondria izolowane z SERCA1 / Sgcd A /. myszy były chronione przed obrzękiem, który inaczej wystąpiłby w mitochondriach izolowanych z Sgcd2 /. mięsień (figura 7, ACH). Oprócz aktywacji otwarcia MPTP i kalpainy (12, 13), rozregulowane wejście Ca2 + może spowodować wytworzenie reaktywnych form tlenu i azotu, co dodatkowo przyczyni się do niestabilności błony komórkowej i degeneracji miofibry (34. 36). Zwiększone usuwanie Ca2 + z transgenem SERCA1 nie tylko chroniło mitochondria przed obrzękiem i zmniejszoną aktywacją kalpainy, ale także zapewniało pewien stopień ochrony membrany, co oceniono na podstawie wychwytu EBD, co sugeruje, że zwiększony dopływ Ca2 + generuje. Przekazywanie do przodu. proces chorobowy, który dodatkowo osłabia sarkolemmę. Nadekspresja sprzężonego EC SERCA1 mięśnia szkieletowego mięśnia szkieletowego, takiego jak znaczny spadek spoczynkowych poziomów Ca2 +, zwiększona amplituda przejściowego i szybszego klirensu Ca2 + z cytoplazmy (Fig. 1, D. F). Co ciekawe, nadekspresja serca SERCA1 również powodowała podobne wzmocnienie czynności serca w punkcie wyjściowym (37). W mięśniu dystroficznym kinetyka manipulacji SR Ca2 + jest prawdopodobnie obniżona, potencjalnie z powodu zmniejszonej aktywności SERCA (16. 18, 38). Chociaż mechanizm zmienionej aktywności SERCA1 w MD nie jest obecnie znany, zaobserwowaliśmy 50-procentowy wzrost mRNA sarcolipiny w mięśniu czterokończynowym Sgcd2 / /. myszy (dane nie pokazane)
[więcej w: herbata czarna właściwości, łowisko u roberta, sanatoria nad morzem nfz ]
[hasła pokrewne: leclerc godziny otwarcia, jak naturalnie rozjaśnić włosy, nefrolog dziecięcy wrocław ]